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实验 细菌形态的观察
一、实验目的
1.认识细菌的基本形态。
2.学习并掌握细菌压滴片及悬滴片的制作方法。
二、实验原理
1.压滴法将细菌悬液滴于载玻片中央，加上盖玻片，置于显微镜下观察。此法是研究微生物形态最简单、最基本的方法之一。
2.悬滴法将细菌悬液滴于盖玻片中央，翻转，置于凹玻片的凹窝中央，由于细菌不受盖玻片的压力影响，所以此法常用于观察并区别细菌运动的方式，也可观察细菌的繁殖方式及孢子萌发等。
3.利用暗视野显微镜形成黑暗背景、被检物构成亮点的特性，可进行细菌运动方式的观察。
三、实验材料和用具
1.菌种 金**葡萄球菌 (Staphylococcus aureus)
大肠杆菌 (Escherichia coli)
普通变形杆菌 (Proleus vulgaris)
枯草芽孢杆菌 (Bacillus subtilis)
黏质沙雷氏菌 (Serratia marcescens)
细菌三种基本形态的染色片
2.用具 显微镜、载玻片、凹玻片、接种环、纱布、镜头纸、镊子、盖玻片、特种铅笔、无菌水、凡士林、火柴、酒精灯、玻片架、香柏油、二甲苯等，722s型分光光度计，0.85％NaCl溶液。
四、实验方法
1.压滴标本制作
①取—清洁载玻片，放在酒精灯的右侧桌面上，用记号笔在玻片右侧注明观察菌体的名称。
②点燃酒精灯，取一小滴清洁的无菌水置于玻片中央。
③用无菌操作取出少许菌苔，于玻片水中，涂匀(见图2-1)。
④用镊子取清洁的盖玻片。由一端与玻片的菌液接触，徐徐放下盖玻片，注意避免产生气泡。
⑤将压滴标本放于显微镜下观察（图2-2）。
2.悬滴标本制作
①取清洁的凹玻片和盖玻片各一片 [图2-3 (a)、(b)]；
②用火柴杆取少许凡士林涂于盖玻片的四角；
③在盖玻片中央用接种环蘸取一小滴无菌水，然后用无菌操作取少许菌苔在水滴上轻沾一下，注意水滴大小要适宜，放菌苔时不要使水滴破散；
④将凹玻片翻转向下，使凹窝中央对准盖玻片中央液滴，然后轻压。使凹玻片与盖玻片粘合紧密，以免蒸发，然后很快将凹玻片翻转，使盖片向上 [图2-3 (c)、(d)]。
⑤将制作好的悬滴片置于显微镜下观察。
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